1、应由受过良好培训的人员负责高压灭菌器的操作和日常维护。
2、预防性的维护程序应包括：由有资质人员定期检查灭菌器柜腔、门的密封性以及所有的仪表和控制器。
3、应使用饱和蒸汽，并且其中不含腐蚀性抑制剂或其他化学品，这些物质可能污染正在灭菌的物品。
4、所有要高压灭菌的物品都应放在空气能够排出并具有良好热渗透性的容器中；灭菌器柜腔装载要松散，以便蒸汽可以均匀作用于装载物。
5、当灭菌器内部加压时，互锁安全装置可以防止门被打开，而没有互锁装置的高压灭菌器，应当关闭主蒸汽阀并待温度下降到80℃以下时再打开门。
6、当高压灭菌液体时，由于取出液体时可能因过热而沸腾，故应采用慢排式设置。
7、即使温度下降到80℃以下，操作者打开门时也应当戴适当的手套和面罩来进行防护。
8、在进行高压灭菌效果的常规监测中，生物指示剂或热电偶计应置于每件高压灭菌物品的中心。最好在“最大”装载时用热偶计和记录仪进行定时监测，以确定灭菌程序是否恰当。
9、灭菌器的排水过滤器（如果有）应当每天拆下清洗。
10、应当注意保证高压灭菌器的安全阀没有被高压灭菌物品中的纸等堵塞。